Aký je účel primárnej protilátky vo Western blote?
Aký je účel primárnej protilátky vo Western blote?

Video: Aký je účel primárnej protilátky vo Western blote?

Video: Aký je účel primárnej protilátky vo Western blote?
Video: Calling All Cars: Old Grad Returns / Injured Knee / In the Still of the Night / The Wired Wrists 2024, Júl
Anonim

Metóda priamej detekcie je konjugovaná s enzýmom alebo fluoroforom primárna protilátka sa používa na detekciu požadovaného antigénu na blot . Pri metóde nepriamej detekcie neoznačený primárna protilátka sa najskôr používa na väzbu na antigén.

Ďalej, čo je primárna protilátka vo Western blote?

The primárna protilátka rozpoznáva a viaže epitop alebo špecifickú aminokyselinovú sekvenciu požadovaného proteínu. Sekundárne protilátky používa western blot sú typicky konjugované s enzýmom; najbežnejšie používanými enzýmami sú peroxidáza z konskej reďkovky (HRP) a alkalická fosfatáza (AP).

Navyše, čo robí primárna protilátka? Primárne protilátky sú imunoglobulíny, ktoré sa viažu na špecifický antigén ( bielkoviny (peptid, malá molekula, atď.), ktoré sú predmetom záujmu a sú typicky nekonjugované. Dobrá primárna protilátka rozpoznáva a viaže sa s vysokou afinitou a špecifickosťou na čistenie, detekciu a meranie antigénu.

Aký je teda účel Western blotu?

A western blot je laboratórna metóda používaná na detekciu špecifických molekúl proteínu zo zmesi bielkovín. Ďalej sú molekuly proteínu oddelené podľa ich veľkosti pomocou metódy nazývanej gélová elektroforéza. Po oddelení sa proteíny prenesú z gélu na a blotting membrána.

Ako sa používajú protilátky pri westernovom prenose?

Protilátky sú použité na detekciu cieľových bielkovín na western blot (imunoblot). The protilátky sú konjugované s fluorescenčnými alebo rádioaktívnymi značkami alebo enzýmami, ktoré poskytujú následnú reakciu s aplikovaným činidlom, čo vedie k zafarbeniu alebo emisii svetla, čo umožňuje detekciu.

Odporúča: